Técnica de Edición de Acidos Nucléicos

Tipo de Edición: Ex vivo en células somáticas. Dirigida al genoma nuclear. 

Dirigido hacia: ADN nuclear 

Dirigido por: ADN y vectores virales lentivirales con secuencias dCas9-VP64, MS2-p65-HSF1 y sgRNA

Organo a tratar: Pulmones y riñones (células pulmonares humanas, línea A549 y células renales caninas, MDCK)

Vía de administración: In vitro (mediante transducción lentiviral de las células cultivadas) 

Resultados:

• Corto; Sobreexpresión del gen B4GALNT2 en células, lo que genera resistencia inmediata a la infección por virus de influenza aviar. 
• Mediano; Las células que expresan B4GALNT2 permanecen protegidas frente a repetidas infecciones con distintas cepas de influenza aviar, gracias a la modificación de los glicanos de superficie que impide el anclaje del virus.
• Largo plazo; Si se logra inducir B4GALNT2 en pulmones de pacientes oanimales, teóricamente podría conferirse protección contra todas las cepas de influenza aviar evaluadas (H5, H7, H9, H10), previniendo la infección. 

Tomada de: PubMed Central

Referencias Bibliográficas: 

1. Heaton BE, Kennedy EM, Dumm RE, Harding AT, Sacco MT, Sachs D, Heaton NS. A CRISPR Activation Screen Identifies a Pan-avian Influenza Virus Inhibitory Host Factor. Cell Rep. 2017 Aug 15;20(7):1503-1512. doi: 10.1016/j.celrep.2017.07.060. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5568676/

Terapia con Stem Cells en la Leucemia

TIPO DE STEM CELL: Células Madre Pluripotentes Inducidas (iPSC)

MÉTODO DE OBTENCIÓN: Las células iPSCs se obtuvieron mediante la reprogramación de células somáticas adultas, generalmente fibroblastos, a través de la introducción de cuatro factores de transcripción clave —OCT4, SOX2, KLF4 y MYC— utilizando vectores virales que integran estos genes en el genoma celular, logrando así la desdiferenciación a un estado pluripotente; posteriormente, estas iPSCs fueron diferenciadas in vitro hacia linajes hematopoyéticos mediante protocolos específicos que incluyen la modulación de señales y factores de crecimiento como Runx1 y Notch, promoviendo la transición endotelio-hematopoyética para generar progenitores hematoendoteliales capaces de producir células madre hematopoyéticas funcionales, las cuales pueden ser usadas para trasplantes con menor riesgo de rechazo inmunológico.

Las células fueron sometidas a pruebas de control de calidad para garantizar que estuvieran vivas, libres de gérmenes, que fueran del tipo celular correcto y que no tuvieran contaminaciones microbiológicas.

VÍA DE ADMINISTRACIÓN (enteral o parenteral): Parenteral (infusión intravenosa) 

RESULTADOS

• Corto (1 año): Recuperación del sistema hematopoyético, riesgo de rechazo, posibilidad de enfermedad injerto contra huésped (GVHD).
• Mediano (3 año): Consolidación de la función inmune y hematológica, posibilidad de complicaciones inmunológicas o infecciosas.
• Largo plazo (>5 año): Remisión de la leucemia (en muchos casos), riesgo de recaída y posibles efectos secundarios crónicos. 

Figura 1. Trasplante de células madre de un donante. Tomada de NIH

Evidencia de Búsqueda Bibliográfica: 

Referencias Bibliográficas: 

1. Dessie G, Molla MD, Shibabaw T, Ayelign B. Papel del trasplante de células madre en el tratamiento de la leucemia. Stem Cells Cloning Adv Appl. 2020;13:67-77. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC7493021/

ADN recombinante artificial en la Hemofilia y Ácidos Nucleicos recombinantes en la naturaleza sin manipulación humana

ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL EN LA HEMOFILIA 

T: Uso del turoctocog alfa, un nuevo factor VIII recombinante (rFVIII) como tratamiento de la Hemofilia A.

O: Describir brevemente las propiedades moleculares y biológicas del turoctocog alfa, junto con detalles de su desarrollo clínico, con énfasis en las necesidades de los pacientes con hemofilia A.

G: Gen del factor VIII humano (FVIII)

ER: No menciona

EL: No menciona

V: Plásmido (opX)

CP: Célula eucariota CHO

MTG: Transfección mediada por plásmido → dihidrofolato reductasa (DHFR) / Sulfatación

MIC: Cultivo, fluorescencia, secuenciación, mapeo de péptidos y espectrometría de masas

ÁCIDO NUCLEICO RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA SIN MANIPULACIÓN HUMANA

ADN Mitocondrial 

La formación de ADN mitocondrial mediante transferencia horizontal de genes (TGH) ocurre cuando fragmentos de ADN de una mitocondria foránea se introducen en otra célula, generalmente por fusión o intercambio entre mitocondrias de diferentes orígenes. Estos fragmentos se integran en el genoma mitocondrial nativo, generando un genoma mitocondrial quimérico. Este proceso puede darse también cuando ADN mitocondrial se transfiere al ADN nuclear y se hereda en la línea germinal. La TGH mitocondrial contribuye a la variabilidad genética y evolución celular sin transmisión vertical directa. Finalmente, esta integración puede ser transmitida a la descendencia si ocurre en células germinales.

Imagen 2. Mecanismos principales de la transferencia mitocondrial horizontal (MT)

Tomada de: Journal of Translational Medicine

Evidencia de Búsqueda Bibliográfica: 

Referencias Bibliográficas: 

1. Santagostino E. Un nuevo factor VIII recombinante: de la genética al uso clínico. Drug des Devel ther. 2014; 8:2507-2515. Disponible en: https://www.dovepress.com/a-new-recombinant-factor-viii-from-genetics-tonbspclinical-use-peer-reviewed-fulltext-article-DDDT
2. Lorio R, Petricca S, Mattei V, Delle Monache S. Transferencia mitocondrial horizontal como una nueva herramienta bioenergética para células estromales/mesenquimales: mecanismos moleculares y potencial terapéutico en una variedad de enfermedades. Journal of Translational Medicine. 24 de mayo de 2024;22(1):491. Disponible en: https://translational-medicine.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12967-024-05047-4#citeas